X射線三維顯微鏡攝影使得很大數(shù)目的顯微鏡在較短時間內(nèi)涵一個很小的標本區(qū)域內(nèi)進行,在某種水平上就大概束了每一片格的暴光時間;既使在進行縮時拍攝時,也因思量到活體細小生物或活體細胞處于接續(xù)地行動狀況,因此在顯微鏡中暴光時間的很大的解放度在這里就不存在了?;铙w生物行動的另一個結果是的聚焦平面也是時常更改的,既即是活體生物自己(例如細菌或游離細胞)偶然乃至能夠挪動到視場以外,因此在尼康顯微鏡影戲拍攝時代應該對物體平面上的聚焦接續(xù)地進行調(diào)治,而且密切監(jiān)督被拍攝的活體對象,使它時常處于視場的中心。這種聚焦和監(jiān)督是通過攝影機上的一個具備半反射棱鏡的聚焦目鏡來進行的.
由于思量到在X射線三維顯微鏡攝影中很短的暴光時間,顯微鏡在聚焦目鏡中應用使光進行不對稱漫衍的分外棱鏡,70%的光用于攝影,30%的光用于聚焦和監(jiān)督。用于顯微鏡的光源大多數(shù)是氣體放電燈(高壓汞燈或氮燈),除了很低的放大倍數(shù)以外,在許多情況下特別是應用相差技術時,白熾燈不能夠產(chǎn)生充足的亮光度以保證顯微攝影所必需的很短的暴光時間。在曝光時間的控制中應該留意到,與攝影速率相聯(lián)系的暴光時間不會隨攝影機速率而變更,惟有在照明中留有充足的余地,在應用不同感光速率的膠片質(zhì)料和中密度濾片刻,才氣到達的暴光。在顯微鏡攝影中,由于進行短時間的暴光,使高速攝影機的應用也受到必然的大概束。若以64格/秒的速率拍攝,在一分鐘內(nèi)就能夠拍攝30m膠片,在此時代大概不少于4,000個片格應該被暴光。既應用18--'24格/秒的普通速率(相當于普通影戲的放映速率),暴光時間也不能夠低于1/50s,因為從一個格移到另一格的時間也務必計較在內(nèi),在此時代攝影機的快門務必封閉。
在科學鉆研中所應用的X射線三維顯微鏡影戲膠片普通為16毫米的膠片,這種膠片圖像的尺寸為7.5x10.4毫米,每米長度具備130格。而每米具備52格的35毫米的膠片在顯微鏡中是不常應用的,這不僅由于它的圖像面積(16x22毫米)是16毫米膠片的4.5倍,從而減小了圖像平面上的光密度,而且在經(jīng)濟上也是很不合算的。當今在另有一種超一8膠.片已被用于顯微鏡攝影,它的圖像尺寸為4.2x5.7毫米,這種膠片的一個大的好處是與16毫米膠片相比費用更低,固然它不適于為大量的觀眾放映,但在科學鉆研中或是有較大的代價。